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麥氏比濁法測定細菌濃度(麥氏比濁管的使用說明)
上傳時間:2020/5/27  點擊:

在微生物學中,通過比對溶液濁度,麥氏比濁管常用來校對細菌懸浮液至某個特定濃度。例如在醫藥學領域常見的微生物抗藥物敏感性試驗中,用來測量較小抑菌濃度。

麥氏比濁管是通過混合特定濃度的氯化鋇和硫酸,從而形成硫酸鋇懸浮液。例如0.5號麥氏比濁管是由0.05毫升1%氯化鋇溶液加9.95毫升1 %硫酸制成。現在也有由乳膠粒子懸浮液制成的麥氏比濁管,與傳統的麥氏比濁管相比,保存時間更長也更穩定。

管號(McFarland)

0.5

1

2

3

4

5

0.25%Bacl2(mL)

0.1

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

1%H2SO4(mL)

4.9

4.8

4.6

4.4

4.2

4.0

細菌的近似濃度(×10^8/mL)

1.5

3

6

9

12

15

細菌的近似濃度(百萬/ mL)

150

300

600

900

1200

1500

【使用方法】

1、 輕搖標準試管。

2、 無菌操作將被測定的肉湯培養物加到與標準管相同直徑(大小)的無菌試管中。

3、 以無菌操作向被測定試管加入無菌蒸餾水,直到濃度與所要求的標準管的濃度相同。

【計算被測培養物試管的濃度】:

1、0.5號麥氏濁度標準管約相當于1.5×10^8個細菌/ml。

2、1.0號麥氏濁度標準管約相當于3×10^8個細菌/ml。

3、細菌濃度標準管號×3×10^8=該管號的細菌數/ml。

3、如果是酵母。相應的數值要除以30。

【制備所要求的濃度,如需要10^5細菌的濃度】:

1、相當1.0號麥氏濁度標準管(3×10^8)的細菌作1:3稀釋到10^8。

2、再作1:1000稀釋。為1×10^5個細菌/ml。

3、10^8÷10^5=10^3

【注意事項】:

A

1、若有大顆粒出現,此標準管應更換。

2、該比濁管僅用于微生物檢驗中,生化試驗的細菌數量估算,不可用于精密定量。

3、該玻璃管和蓋子可以高壓滅菌、可以重復使用。

4、標準無菌生理鹽水管僅用于空白對照,請勿用于配制樣品管。

B

1、如果測定的肉湯培養物不澄清,則由培養物的值減去未接種培養基的值來校正細菌濃度。

例: 4號管(肉湯培養物)-1號管(孵育過的未接種的肉湯管)=3號管(校正讀數)

2、如果肉湯顏色很深,把未接種試管放在標準管的后面讀數即可。


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